ÿþ<HTML><HEAD><TITLE>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </TITLE><link rel=STYLESHEET type=text/css href=css.css></HEAD><BODY aLink=#ff0000 bgColor=#FFFFFF leftMargin=0 link=#000000 text=#000000 topMargin=0 vLink=#000000 marginheight=0 marginwidth=0><table align=center width=700 cellpadding=0 cellspacing=0><tr><td align=left bgcolor=#cccccc valign=top width=550><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=3><font size=1>25º Congresso Brasileiro de Microbiologia </font></font></strong><font face=Verdana size=1><b><br></b></font><font face=Verdana, Arial,Helvetica, sans-serif size=1><strong> </strong></font></font></td><td align=right bgcolor=#cccccc valign=top width=150><font face=arial size=2><strong><font face=Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif size=1><font size=1>ResumoID:2263-2</font></em></font></strong></font></td></tr><tr><td colspan=2><br><br><table align=center width=700><tr><td>Área: <b>Fermentação e Biotecnologia ( Divisão J )</b><p align=justify><strong>BIOSSÍNTESE DE ÁCIDO GLICÔNICO E CETODERIVADOS POR MUTANTES DE <SPAN STYLE="FONT-STYLE: ITALIC;">GLUCONACETOBACTER DIAZOTROPHICUS</SPAN> EM CONDIÇÕES DE FIXAÇÃO BIOLÓGICA DE NITROGÊNIO (FBN)<BR><BR> </strong></p><p align=justify><b>Renata Jorge da Silva </b> (<i>UFRRJ</i>); <b>Marília Penteado Stephan </b> (<i>Embrapa - CTAA</i>); <b>Ronoel Luiz de Oliveira Godoy </b> (<i>Embrapa - CTAA</i>); <b>Jeane Santos da Rosa </b> (<i>Embrapa - CTAA</i>); <b>Vanessa Tavares da Silva Souza </b> (<i>Embrapa - CTAA</i>); <b><u>Kátia Regina dos Santos Teixeira </u></b> (<i>Embrapa Agrobiologia</i>)<br><br></p><b><font size=2>Resumo</font></b><p align=justify class=tres><font size=2> <span style="font-style: italic;">Gluconacetobacter diazotrophicus</span> é uma <span style="font-style: italic;">Acetobacteriaceae</span> fixadora de N<sub>2</sub> capaz de realizar, através da fermentação oxidativa da glicose, produção de ácido glicônico e seus cetoderivados como produtos finais. Os ácidos produzidos através deste processo oxidativo podem ser úteis como matéria-prima tanto nas indústrias farmacêutica como alimentícia e têxtil. Sob condições limitantes de nitrogênio, nesta espécie a fixação biológica de nitrogênio (FBN) pode ocorrer simultaneamente a este processo oxidativo até mesmo em condições extremas de pH, O<sub>2</sub> e pressão osmótica. Visando a obtenção de microrganismos geneticamente modificados capazes de produzir cada um destes ácidos, foi utilizada uma biblioteca de mutantes obtidos pela inserção de Tn5 no genoma de <span style="font-style: italic;">G. diazotrophicus </span>PAL5<sup>T</sup> para selecionar mutantes alterados nas características de acidificação do meio e coloração da colônia em meio de cultivo seletivo. Os mutantes aleatórios selecionados foram avaliados em relação a sua capacidade de crescimento em condições de FBN em meio semi-sólido (sais de LGI-P) contendo diferentes fontes de carbono (açúcar cristal, glicose, ácido glicônico ou manitol). Para avaliação do processo fermentativo foram realizados cultivos em frascos de 100 mL contendo a solução de sais do meio LGI-P, 50 g/L de glicose e 1 mM de (NH<sub>4</sub>)<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>. As amostras foram coletadas aos 3, 4 e 5 dias de incubação para o monitoramento da atividade específica da nitrogenase (redução de acetileno em CG), determinação de ácidos orgânicos (HPLC) presentes nos sobrenadantes dos cultivos e quantificação de proteínas pelo método de Bradford. Pôde-se verificar formação de película em meio semi-sólido tanto para a estirpe selvagem como para os mutantes em presença de glicose e açúcar cristal, enquanto que manitol e ácido glicônico não foram fontes de carbono capazes de permitir a expressão de FBN nestas condições. Tanto a atividade específica da nitrogenase como a capacidade de formar biomassa mostraram diferenças entre os mutantes selecionados e a estirpe selvagem. A observação de diferenças qualitativa na produção de ácido glicônico e um de seus cetoderivados entre os mutantes avaliados comprovou o potencial de utilização destas estirpes como ferramenta biotecnológica. <br>Apoio: Embrapa- MP3 Processo No. 03.06.09.013.00; Pronex-FAPERj Processo No. E.26/171.523/2006; CNPq/Processo No: 552820/2007-5 </font></p><br><b>Palavras-chave: </b>&nbsp;Gluconacetobacter diazotrophicus, fixação biológica de nitrogênio (FBN), mutantes, oxidação da glicose, Ácido glicônico e cetoderivados</td></tr></table></tr></td></table></body></html>