25º Congresso Brasileiro de Microbiologia

ANÁLISE COMPARATIVA DE TÉCNICAS ALTERNATIVAS PARA A IDENTIFICAÇÃO DAS ESPÉCIES DO COMPLEXO "STREPTOCOCCUS BOVIS / STREPTOCOCCUS EUINUS"਀

Felipe Piedade Gonçalves Neves (IMPPG/UFRJ); Giseli da Silva da Costa Wienen (IMPPG/UFRJ); Nelson Alves Junior (IB/UFRJ); Oswaldo da Silva Maia Neto (IB/UFRJ); Fabiano Thompson (IB/UFRJ); Patricia Lynn Shewmaker (CDC); Arnold Steigerwalt (CDC); Maria da Gloria S. Carvalho (CDC); Richard Facklam (CDC); Lúcia Martins Teixeira (IMPPG/UFRJ)

O complexo "Streptococcus bovis / Streptococcus equinus" é composto por espécies altamente relacionadas, de difícil diferenciação tanto por métodos convencionais quano moleculares. Nos últimos anos, o interesse pela precisão na identificação desses microrganismos foi renovado, sobretudo por seu envolvimento em infecções invasivas em humanos e pelas evidências de sua associação com bacteremia e câncer de cólon. Apesar de estudos rescentes terem trazido importantes contribuições, a posição taxonômica precisa de algumas das espécies descritas continua controversa. O objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial discrminatório de metodologias alternativas para a identificação desses microrganismos e realizar uma análise filogenética empregando três segmentos gênicos: 16SrDNA, pheS e hsp60. Para tal, foram estudadas 23 amostras de referência e uma coleção de 134 amostras clínicas pertencentes a este complexo de microrganismos.Dois sistemas miniaturizados de identificação foram avaliados, incluindo o API 20 Strep e o Rapid ID 32 Strep, e ambos apresentaram falhas em identificar corretamente algumas amostras. Dentre as amostras clínicas, aquelas pertencentes à S. gallolyticus subsp. gallolyticus foram mais frequentemente identificadas com precisão. A análise do 16SrDNA permitiu a separação de S. alactolyticus e S. gallolyticus em clusters distintos, enquanto que S. equinus e S. infantarius foram agrupadas em diferentes subdivisões de um mesmo cluster. Por outro lado, a análise das sequências dos genes pheS e hsp60 evidenciaram uma distinção mais clara entre essas espécies, embora não tenha propiciado uma distinção tão nítida entre as subespécies de S. gallolyticus. A análise conjunta dessas sequências possibilitou a discriminação entre todas essas espécies e subespécies. Foi constatada, ainda, uma divergência significativa entre as sequências dos genes pheS e hsp60 de S. infantarius subsp. infantarius e S. infantarius subsp. coli, sugerindo a possível separação dessas subespécies em duas espécies distintas, embora as sequências do gene 16SrDNA dessas subespécies indiquem uma baixa divergência. Os resultados demonstram a aplicabilidade da análise de sequências conservadas presentes em múltiplos loci no genoma bacteriano para auxiliar na identificação das espécies pertencentes ao complexo "S. bovis / S. equinus" e para refletir as relações filogenéticas entre esses microrganismos.਀